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限外濾過遠沈管は再利用できますか?答えはこれです

遠沈管は、一部のサンプルの分離や上澄みの沈殿物の分離など、高い回転速度と圧力に耐えることができるシンプルなチューブです。限外濾過遠心管は、内管と外管と同様の 2 つの部分から構成されます。内管は一定の分子量を持った膜です。高速遠心分離では、分子量の小さいものは下の管(外管)に漏れ出し、分子量の大きなものは上の管(内管)に閉じ込められます。これは限外濾過の原理であり、サンプルを濃縮するためによく使用されます。

限外濾過遠心管は通常、前処理なしで使用できますが、タンパク質サンプルの処理、特に希薄タンパク質溶液(< 10ug/ml)の場合、限外濾過膜による濃縮の回収率は定量的ではないことがよくあります。PES 材料は非特異的吸着を最小限に抑えますが、一部のタンパク質、特に希釈した場合に問題が発生する可能性があります。非特異的結合の程度は個々のタンパク質の構造によって異なります。荷電ドメインまたは疎水性ドメインを含むタンパク質は、異なる表面に不可逆的に結合する可能性が高くなります。限外濾過遠心管の表面の不動態化前処理により、膜表面へのタンパク質吸着の損失を軽減できます。ほとんどの場合、希釈タンパク質溶液を濃縮する前にカラムを前処理すると、膜や表面に露出した空白のタンパク質吸着サイトを溶液で埋めることができるため、回収率が向上します。不動態化方法は、カラムを多量の不動態化溶液に 1 時間以上事前に浸し、蒸留水でカラムを徹底的に洗浄した後、蒸留水で 1 回遠心分離して、フィルム上に残っている不動態化溶液を完全に除去します。 。パッシベーション後はフィルムが乾燥しないように注意してください。後で使用する場合は、フィルムの湿り気を保つために滅菌蒸留水を追加する必要があります。

限外濾過遠心管は通常、滅菌して再利用することができません。一本のチューブの価格は決して安いものではないため、再利用しようとする人が多く、蒸留水で膜表面を何度も洗浄したり、遠心分離を 1 ~ 2 回行ったりする経験があります。逆遠心分離できる小さなチューブを蒸留水に浸し、さらに何回も逆遠心分離することができ、より効果的です。同じサンプルに繰り返し使用でき、使用しないときは蒸留水に浸しておくこともできますが、細菌汚染を防ぐ必要があります。異なるサンプルを混合しないでください。20%のアルコールと1n NaOH(水酸化ナトリウム)に浸すと雑菌の繁殖が抑えられ、乾燥も防げるという人もいます。限外濾過膜は水分が侵入している限り、乾燥させることはできません。しかし、膜構造を破壊するだろうと言う人もいます。いずれにせよ、メーカーは一般的に再利用をサポートしません。繰り返し使用するとフィルター膜の孔径が詰まり、場合によっては液漏れが発生し、実験結果に影響を及ぼします。

 


投稿日時: 2022 年 9 月 5 日