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PCR実験で一般的に使用されるいくつかの酵素

ポリメラーゼ連鎖反応、略称PCR英語では、特定の DNA 断片を増幅するために使用される分子生物学の手法です。これは、微量の DNA を大幅に増加させることができる、体外での特別な DNA 複製とみなすことができます。全体を通してPCR反応プロセスでは、ある種類の物質、つまり酵素が重要な役割を果たします。

1.Taq DNA

初期の頃の実験ではPCR科学者らは大腸菌 DNA ポリメラーゼ I を使用しましたが、この酵素には問題があります。サイクルを実行するたびに新しい酵素を補充する必要があるため、操作手順が若干複雑になり、完全に自動で増幅することが困難です。この問題は、1988 年に科学者が Thermus aquaticus から Taq DNA ポリメラーゼを誤って単離したことで解決されました。それ以来、DNA の自動増幅が現実になりました。この酵素の発見により、PCRテクノロジーは便利で実用的で普遍的なテクノロジーです。現在、Taq DNA ポリメラーゼは、DNA キットで最も一般的なポリメラーゼです。

2.PfuDNA

前述したように、Taq DNase には大きなバグがあるため、科学者はミスマッチによる非特異的増幅を回避するために Taq DNA ポリメラーゼをある程度改変して不正確な検査結果をもたらしました。しかし、Taq DNA ポリメラーゼを修飾すると、室温での DNA ポリメラーゼの活性が阻害される可能性があります。PfuDNA ポリメラーゼは、Taq DNA ポリメラーゼの上記の欠点を十分に補うことができるため、PCR 反応を正常に実行することができ、標的遺伝子の増幅の成功率を効果的に向上させることができます。

3. 逆転写酵素

逆転写酵素は 1970 年に発見されました。この酵素は、RNA を鋳型として、dNTP を基質として使用し、塩基対形成の原理に従い、RNA 鋳型に対して 5'-3' 方向に相補的な DNA 一本鎖を合成します。逆転写酵素は主に DNA または RNA テンプレートからの DNA ポリメラーゼ活性に依存しているため、3'-5' エキソヌクレアーゼ活性はありません。ただし、RNase H活性があり、逆転写酵素の合成長がある程度制限されます。野生逆転写酵素は忠実度が低く熱安定性が低いため、科学者はそれを改変しました。

PCR管系

のためにPCR実験に使用する主な消耗品は、個別の PCR チューブ、4/8 ストリップ PCR チューブ、PCR プレートです。

ラビオさんPCR消耗品次のものを持っています利点:

PCRプレート: 幅広いサーマルサイクラー互換性。高コントラストでウェルの識別が簡単。蛍光反射が良好;良好熱伝達;認定された DNase、RNase、DNA、PCR 阻害剤、およびパイロジェンフリーのテスト済み。

個別の PCR チューブ: 耐蒸発性、良好熱伝達;優れた光学的透明性、認定された DNase、RNase、DNA、PCR 阻害剤、およびパイロジェンフリーのテスト済み。

4/8 ストリップ PCR チューブ: 超薄壁、高い透明度、良好​​な蛍光反射。製薬産業、食品産業、分子生物学で使用可能、高品質のバージン PP 素材、認定された DNase、RNase、DNA、PCR 阻害剤、テスト済みのパイロジェンフリー。

 

 


投稿時刻: 2023 年 6 月 9 日