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細胞培養の具体的な手順

1. 共通装備

1. 準備室の設備

単式蒸留水蒸留器、二回蒸留水蒸留器、酸タンク、オーブン、圧力鍋、保管庫(未滅菌品保管)、保管庫(滅菌品保管)、包装台。溶液調製室の設備:ねじり天秤および電子天秤(薬品を秤量する)、PHメーター(培養液のPH値を測定する)、マグネチックスターラー(溶液を撹拌するための溶液室を構成する)。

2. 培養室の設備

液体窒素タンク、保管庫(雑貨収納)、蛍光灯・紫外線ランプ、空気清浄機、低温冷蔵庫(-80℃)、エアコン、炭酸ガスボンベ、サイドテーブル(試験記録記入)。

3. 無菌室に設置しなければならない機器

遠心分離機(細胞回収)、超清浄作業台、倒立顕微鏡、CO2インキュベーター(培養培養)、ウォーターバス、三酸素消毒滅菌機、4℃冷蔵庫(血清、培養液を入れる)。

 

2、無菌操作

(1) 無菌室の滅菌

1. 無菌室を定期的に清掃します。週に 1 回、最初に水道水で床をモップ掛けし、テーブルを拭き、作業テーブルを掃除します。次に、3 リットルのリゾールまたはブロモゲラミン、または 0.5% 過酢酸を使用して拭きます。

2. CO2 インキュベーター(培養器)の滅菌:まず 3 リットルのブロモゲラミンで拭き、次に 75% アルコールまたは 0.5% 過酢酸で拭き、紫外線ランプを照射します。

3. 実験前の滅菌: 紫外線ランプ、三酸素滅菌器、空気清浄機システムをそれぞれ 20 ~ 30 分間オンにします。

4. 実験後の滅菌: 非常に清潔なテーブル、サイドテーブル、倒立顕微鏡ステージを 75% アルコール (3 パーセントのブロモゲラミン) で拭きます。

 

 

検査員の滅菌準備

1. 石鹸で手を洗います。

2. 隔離服、隔離キャップ、マスク、スリッパを着用してください。

3. 75% アルコール綿球で手を拭きます。

 

無菌操作のデモンストレーション

 

1. 超清浄作業台に持ち込んだアルコール、PBS、培地、トリプシンのボトルはすべて、ボトルの外面を 75% アルコールで拭いてください。

2.アルコールランプの炎の近くで作業してください。

3. 器具は使用前に滅菌する必要があります。

4. 継続して使用する器具(ボトルキャップやスポイトなど)は高い場所に置き、使用中に過熱する必要があります。

5. すべての操作はアルコールランプの近くで行い、動作は軽くて正確である必要があり、むやみに触らないでください。ストローが廃液タンクに触れない場合。

6. 2種類以上の液体を吸引する場合は、クロスコンタミネーションを防ぐため、吸引パイプの交換に注意してください。

器具の消毒については次の章を参照してください。

 


投稿日時: 2023 年 2 月 1 日